Sulfidefluor 7 AM (SF7-AM) (H2S Probe)

硫化氫熒光探針

產品標簽

Sulfidefluor 7 AM (SF7-AM) ; 7-Azido-4-methylcoumarin (AzMC) ；7-氨基-4-甲基香豆su（AMC）；WSP-1 (Washington State Probe-1)；WSP-5；硫化氫（H2S）特異性探針；PAG (DL-propargylglicine)硫化氫合成抑制劑；Hypotaurine  H2S清除劑；CAS NO：1416872-50-8；

產品信息

產品描述

Sulfidefluor 7 AM (SF7-AM)是一種用于硫化氫（H2S）檢測的細胞可捕獲的熒光探針。一旦進入胞內，乙酰甲酯基團被胞內酯酶水解生成一陰電荷，從而探針被捕獲停留在胞內。探針中的疊氮化物官能團與緩沖液或細胞中的H2S反應生成酰胺羅丹明110，激發和發射波長分別是498/526nm [1-2]。SF7-AM能用于監測人臍靜脈內皮細胞（HUVECS）中VEGF誘導產生的H2S [2-3]。

產品特性

1） CAS NO：1416872-50-8

2） 化學名：N-[2-[(Acetyloxy)methoxy]-2-oxoethyl]-N-[(3',6'-diazido-3-oxospiro[isobenzofuran-1(3H),9'- [9H]xanthen]-5-yl)carbonyl]glycine (acetyloxy)methyl ester

3） 同義名：Sulfidefluor-7 acetoxymethyl ester; SF7 AM;

4） 分子式：C31H23N7O12

5） 分子量：685.6

6） 外觀：白色固體

7） 純度：≥95%

8） Ex/Em：498/526nm

9） 溶解性：溶于DMSO（5mg/ml）、DMF（10mg/ml）

10） 化學結構式：

保存與運輸方法

保存：-20oC避光干燥保存，至少2年有效。 

運輸：冰袋運輸。

使用方法

1、 儲存液制備

將低溫保存的產品從冰箱取出，置于室溫回溫至少20min。低速離心3-5min。之后往瓶內加入適量無水DMSO充分溶解配成適宜濃度的儲存液（比如，1mg SF7-AM（Mw: 685.6）加入291μl DMSO充分溶解后即得到5mM儲存液）。按照單次用量分裝，≤-20℃避光凍存，避免反復凍融，建議1個月使用。

2、 工作濃度

正式實驗前，取上述配制的儲存液用適當緩沖液或培養基稀釋到所需工作濃度即可。具體的工作濃度請參考文獻或根據自身實驗需求來進行優化調整。參考下方一些實驗數據，來自公開文獻，僅作參考。

應用示例1：使用SF7-AM來測定VEGF刺激HUVECs產生的內源性H2S。HUVECs加入2.5µM SF7-AM于37℃，5% CO2孵育30min。之后更換不含探針的培養基，細胞成像。對于VEGF刺激，取2µl VEGF（10µg/ml）加入孔內使其終濃度為40ng/ml。細胞再于37℃，5% CO2孵育30min。相同的區域再進行細胞成像。共聚焦成像用488nm氬離子激發器激發，用META檢測器收集500-650nm之間的發射熒光信號?！疚墨I來源：Chao, C., Zatarain, J.R., Ding, Y. et al. Cystathionine-β-Synthase Inhibition for Colon Cancer: Enhancement of the Efficacy of Aminooxyacetic Acid via the Prodrug Approach. Mol Med 22, 361–379 (2016). 】

應用示例2：使用SF7-AM來測定OA-CysTCM-1的H2S釋放能力。bEnd.3細胞鋪在多聚D-賴氨酸包被的培養板上。長滿的細胞用PBS清洗后，用SF7-AM（5 µM）孵育30min。之后用PBS清洗，孵育在含OA-CysTCM-1 (100 µM)和半胱av酸（250 µM）或只含半胱av酸（250 µM）的溶液30min。成像前，細胞用PBS清洗后，加入2ml PBS。用帶標準GFP濾片的熒光顯微鏡成像?！疚墨I來源：Zhao Y, Steiger AK, Pluth MD. Cysteine-activated hydrogen sulfide (H₂S) delivery through caged carbonyl sulfide (COS) donor motifs. Chemical Communications (Cambridge, England). 2018 May;54(39):4951-4954. DOI: 10.1039/c8cc02428f. PMID: 29701221; PMCID: PMC5965689.】

Figure. H2S Release from OA-CysTCM-1 in bEnd.3 cells.Top: DIC (left) and GFP (right) channels with cysteine (250 μM) and SF7-AM (5 μM). Bottom: DIC (left) and GFP (right) channels with cysteine (250 μM), OA-CysTCM-1 (100 μM), and SF7-AM (5 μM). Scale bar represents 100 μM.

注意事項

1） 整個染色過程中需注意避光。

2） 為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

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參考文獻

[1] Lippert AR, New EJ, Chang CJ. Reaction-based fluorescent probes for selective imaging of hydrogen sulfide in living cells. J Am Chem Soc. 2011 Jul 6;133(26):10078-80. doi: 10.1021/ja203661j. Epub 2011 Jun 15. PMID: 21671682.

[2] Lin VS, Lippert AR, Chang CJ. Cell-trappable fluorescent probes for endogenous hydrogen sulfide signaling and imaging H2O2-dependent H2S production. Proc Natl Acad Sci U S A. 2013 Apr 30;110(18):7131-5. doi: 10.1073/pnas.1302193110. Epub 2013 Apr 15. PMID: 23589874; PMCID: PMC3645565.

[3] Yuan S, Pardue S, Shen X, Alexander JS, Orr AW, Kevil CG. Hydrogen sulfide metabolism regulates endothelial solute barrier function. Redox Biol. 2016 Oct;9:157-166. doi: 10.1016/j.redox.2016.08.004. Epub 2016 Aug 11. PMID: 27552214; PMCID: PMC4993857.

 — —Written/Edited by V. Shallan【版權歸MKBio懋康所有】

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